Espectrómetro de fase líquida ultra-rápidoProminenece UFLC

A análise rápida tem sido usada como um tema técnico importante, mas com a rápida popularização do LCMS, a melhoria do custo-benefício tornou-se um problema urgente e um fator importante para acelerar a aceleração.
Análise rápida é a redução do tempo de análise, geralmente alcançado ao reduzir a coluna cromatográfica ou aumentar o fluxo da fase de fluxo. No entanto, com uma coluna de preenchimento comumente usada com tamanho de partícula de 5 μm, o desempenho de separação com qualquer método diminui significativamente, tornando a aceleração sem sentido.
Assim, foram desenvolvidos os seguintes dois métodos:
• Utilização de embalagens de pequenas partículas
Este método tornará possível uma separação rápida. No entanto, devido ao aumento da resistência ao fluxo na coluna cromatográfica, a pressão suportada pelos componentes do instrumento e pela coluna cromatográfica também aumentará significativamente.
• Separação de alta temperatura
Temperaturas mais elevadas podem acelerar a difusão da substância, reduzindo a resistência ao fluxo na coluna cromatográfica e possibilitando a separação rápida. A análise de alta temperatura é eficaz na redução da pressão da coluna, mas as altas temperaturas causam a deterioração da coluna cromatográfica, causando a descomposição da amostra e outras deficiências que precisam ser observadas durante a aplicação.
Para resolver o problema da contrapressão, foram desenvolvidos instrumentos especializados para melhorar a capacidade de suporte à pressão, que geralmente são mais caros. No entanto, esses instrumentos dedicados tiveram que fazer compromissos em termos de desempenho e sensibilidade de amostragem. Além disso, as colunas de preenchimento com preenchimento muito sutil são exigentes para o hardware, o método analítico desenvolvido usando esta coluna cromatográfica sacrifica a versatilidade. Portanto, se esse instrumento for usado em análises HPLC convencionais, sua eficiência será menor.
Prominence suporta separação rápida
Usando componentes padrão, o Prominence pode atender às necessidades dos pesquisadores em análises tradicionais e de alta velocidade, além de suportar temperaturas de operação de até 85 ° C, possibilitando análises rápidas a pressões mais baixas, ao mesmo tempo em que o desempenho analítico e os níveis de fluxo do instrumento são menos comuns, mesmo em configurações de instrumentos mais caras.
O Prominence UFLC suporta análises rápidas com as seguintes características:
• Os pequenos tubos de coluna e piscinas de circulação de pequeno volume reduzem o efeito de expansão do pico extracoluna.
• Use Shim-pack XR-ODS com uma coluna cromatográfica de partículas de 2,2 μm.
O Shim-pack XR-ODS é uma nova geração de colunas cromatográficas analíticas rápidas que levam em consideração os problemas de refinamento de preenchimento acima, encontrando um equilíbrio inteligente entre a eficiência de separação e a relação de pressão para melhorar ou manter o efeito de separação ao mesmo tempo que reduz o tempo de análise.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• O amostrador automático Prominence SIL-20A permite uma amostragem ultra-rápida de 10 μl em 10 segundos.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Suporta análises de alta temperatura até 85°C.
Temperatura e análise rápida: à medida que a temperatura da coluna aumenta, o número de painéis teóricos aumenta, o efeito da coluna aumenta e a pressão da coluna diminui.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Picos: 1: Fenilacetona 2: Fenilacetona 3: Fenilacetona 4: Fenilacetona 5: Fenilacetona 6: Fenilacetona 7: Benzinona
Efeito da temperatura sobre os compostos: a análise de alta temperatura é eficaz na redução da pressão da coluna, mas as altas temperaturas causam a deterioração da coluna cromatográfica, causando a descomposição da amostra e outras deficiências que precisam ser observadas durante a aplicação. A análise de alta temperatura é usada apenas como auxílio para análises rápidas.
• Detectores com alta frequência de amostragem para obter dados rapidamente sem perder informações.
• Software especializado de conversão de métodos cromatográficos que facilita a conversão de condições cromatográficas convencionais para condições UFLC, garantindo a versatilidade dos métodos de análise.

Reprodutividade de análises rápidas
É mais difícil obter a reprodutividade do tempo de retenção de componentes na separação rápida do que na análise convencional. A reprodutividade do tempo de retenção (RSD) e a raiz quadrada do tempo aumentam inversamente, por isso é necessário um desempenho de administração de fluido mais rigoroso do que a análise convencional. A Prominence UFLC garante uma excelente capacidade de administração de fluido em microstroke com resolução de 3 nL/min e resposta controlada em gradiente de 0,1 segundo para uma reprodutividade de tempo de retenção extremamente superior.

O que é um alto fluxo
O objetivo da cromatografia líquida rápida é um alto fluxo, o que significa que mais amostras são analisadas por dia ou por hora. Para obter um alto fluxo, não só é necessário reduzir o tempo de análise de amostras individuais, mas também é necessário otimizar todo o ciclo de amostragem e tempo de análise. O objetivo da aceleração não é apenas reduzir o tempo de análise, mas também o ciclo de análise. A velocidade de injeção de amostras da Prominence UFLC é de 10 segundos, o que abrevia significativamente o período de análise.

Exemplos de aplicação

Análise UFLC de aminoácidos derivados de PTC

A análise de aminoácidos tem dois métodos de detecção, um é o método de derivação pós-coluna após a separação com coluna de cromatografia de troca iónica para a detecção de derivação, o outro é o método de derivação pré-coluna após a derivação, usando coluna de cromatografia de fase inversa para a separação. Do ponto de vista da análise rápida, a derivação pré-coluna é eficaz. Aqui, a análise de aminoácidos foi realizada em menos tempo usando o Shim-pack XR-0DS.
Derivação com isocianato de fenilo. A derivação pós-coluna leva 1 hora e a derivação pré-coluna pode reduzir a análise de 25 minutos para 4 minutos quando a coluna cromatográfica convencional é usada.

Análise UFLC dos pigmentos

Os pigmentos adicionados aos alimentos são compostos sintéticos e compostos naturais, que são altamente solúveis em água e são analisados por HPLC. Mas quando várias combinações de pigmentos são feitas, a análise ao mesmo tempo leva muito tempo. Aqui é apresentado um exemplo de análise simultânea de pigmentos com LC ultra-rápida Shim-pack XR-ODS. Os resultados da análise simultânea de 12 pigmentos componentes são mostrados no cromatograma a seguir. O tempo necessário para a análise com LC convencional é de 50 minutos, enquanto que com LC ultra-rápida, a análise é concluída em cerca de 6 minutos.

Análise UFLC de hidrocarbonetos aromáticos policíclicos (PAHs)

Os HAP são substâncias químicas que determinam o grau de poluição atmosférica por gases de escape, como veículos. Os PAHs são altamente cancerígenos, por isso o monitoramento atmosférico dessas substâncias é um projeto de medição importante. Os PAHs apresentam forte fluorescência e podem ser analisados com detectores de fluorescência de alta sensibilidade.
Para a análise desses 10 PAHs, a UFLC alcançou uma análise 10 vezes mais rápida (5 minutos de análise) em comparação com a LC convencional (50 minutos de análise).